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生物資訊

EBM-2培養(yǎng)基國內代理公司---始于2001年畢特博生物

作者:llq2008 來源:http://www.med66.com/html/zili 發(fā)布時間: 2012-10-23 09:14  瀏覽次數:
購買進口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 m.pyjb.com.cn

EBM-2培養(yǎng)基國內家代理公司---始于2001年畢特博生物

  

以下是網頁的對話內容摘要

請教:
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養(yǎng)基。

是畢特博嗎。

寒冰 wrote:
請教:
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養(yǎng)基。

是畢特博嗎。


我查到的也就只有這家

 

 

以下是來源網址的具體內容:
http://www.med66.com/html/ziliao/yixue/19/23da6eee3d452c3c3ea8e61068369229.htm
請問用什么培養(yǎng)液好啊
tonywujun wrote:
同志們,這段時間養(yǎng)小鼠骨髓來源的EPC出現奇怪現象,其中一些細胞4天后快速增殖,迅速形成片狀集落,細胞可以排列形成線樣結構,且可以融合,有些還有分支,形成的結構很像帶有分支的血管,奇怪了,我從來沒有見過這種細胞,請各位戰(zhàn)友幫忙看看這可能是什么細胞。
一張100倍的圖


應該是瓶子上的劃痕留下的。細胞沿著劃痕生長,看看我養(yǎng)的細胞,更漂亮。呵呵,當時覺得不可思議。其實,是個肝癌細胞而已。

(縮略圖,點擊圖片鏈接看原圖)

不過,我做實驗,發(fā)現好多次,原代EPC培養(yǎng)的時候,確實會出現部分細胞連接成環(huán)狀,幾乎每次原代都可以發(fā)現。可以肯定,不是劃痕所造成的,下圖是比較典型的一張,偷懶,沒有用攝像頭拍,用數碼相機拍的,所以拍攝效果不太好。‘

(縮略圖,點擊圖片鏈接看原圖)

個人同意yulinlong戰(zhàn)友的觀點。
yulinlong戰(zhàn)友的圖片又多又漂亮,與他相比真是遜色多了,
匿了。

首先我肯定的是這不是fibronectin劃痕造成的結果,培養(yǎng)皿內形成的片狀細胞團塊很大,目前已經對此細胞進行了lectin和CD31的免疫熒光鑒定,不表達,基本上表明其不是內皮及其前體細胞,具體是什么細胞還不清楚,但從形態(tài)上講,不像成纖維細胞、內皮細胞、平滑肌細胞、骨骼肌細胞、心肌細胞,不管怎樣,以前從來沒有見過,且比較了所有相關帖子上的細胞,沒有見到相類似的細胞,真是郁悶呀,哪位高人提供一下線索呀。

用國產淋巴細胞分離液分離、提取白膜層后老是混有較多的紅細胞,其影響單個核細胞的貼壁。本人所在實驗室建議使用蒸餾水破除。
請問各位高手,你們是怎么處理這些紅細胞的?
另外使用羥乙基淀粉法效果好嗎?


小小鳥 wrote:
八戒兄:
你在實驗中也能將外周血單核細胞濃度調整到1*10的9次方/L?真是羨慕啊。不過聽我?guī)熃阏f外周血單核細胞不多,要將10 ml的血分離出這么多單核細胞我還是有點詫異。請問八戒兄也是用10ml血分離的嗎?


1*10的9次方/L只是個濃度問題,并不是個數量,10ml血分離1*10的9次方/L×
10ml,是不是?

1*10的9次方/L只是個濃度問題,并不是個數量,10ml血分離1*10的9次方/L×
10ml,是不是?

這個我明白,但我從文獻上看到:成年循環(huán)EPCs數量非常有限(100~500個/ml),照1*10的9次方/L×10ml這樣算,10ml外周血有10的7次方EPCs,還是跟文獻不符啊

 

請教:
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養(yǎng)基。

是畢特博嗎。


寒冰 wrote:
請教:
國內哪家公司代理有VEGF的EBM-2培養(yǎng)基。

是畢特博嗎。


我查到的也就只有這家

在學習了playingstone 戰(zhàn)友的2篇大作(一篇已經發(fā)表:生物醫(yī)學工程與臨床,2005,7,9(4)243~246.恭喜恭喜)之后,受益頗豐:
1.playingstone 戰(zhàn)友培養(yǎng)方法比較有新意,綜合了目前2種有爭論的培養(yǎng)方法。我想問下48h內貼壁細胞和48h后貼壁細胞中內皮祖細胞的純度比較問題,哪個更純一些?也就是說哪個內皮祖細胞含量更多些?
2.playingstone 戰(zhàn)友采用骨髓來源的培養(yǎng)方法,在用密度為1.071的淋巴細胞分離液(上海華精生物制品廠)進行梯度密度離心分離單核細胞,18℃,1500r/min離心23min后。想問下,實驗室采用的是什么離心機,哪個廠家的。因為我們自己也在用這種淋巴細胞分離液,效果很不好,用的是Beck man高效離心機,400g,30min,效果很差,幾乎看不到白膜層,連紅細胞都沒離心下來,試劑是剛買的,未過期。很是郁悶。
3.playingstone 戰(zhàn)友在離心后,似乎未經過洗這一步,就直接制成細胞懸液,是不是在骨髓來源的培養(yǎng)方法中是這樣的呢,有點疑問?呵呵
謝謝,歡迎討論!
一般是800G的離心力,既然你的機子是400G 那就把轉速適當調高就是,比方現在是1500R/M,先調到2500R/M左右試試。,


小小鳥 wrote:
八戒兄:
你在實驗中也能將外周血單核細胞濃度調整到1*10的9次方/L?真是羨慕啊。不過聽我?guī)熃阏f外周血單核細胞不多,要將10 ml的血分離出這么多單核細胞我還是有點詫異。請問八戒兄也是用10ml血分離的嗎?


我是10毫升分大約10的7 單個核細胞的

兩個問題:
1.UEA-I和DiLDL雙染色陽性細胞為正在分化的EPCs的原理是什么?而且我見一篇文獻竟然用是否DiLDL染色陽性區(qū)別EPC和EC,不解
2.有用多聚賴氨酸代替Fn包板的嗎?

 

請都各位,我準備培養(yǎng)大鼠的EPC,不知大家所用的VEGF和b-FGF是哪家公司的,有小包裝嗎?

下面是一篇blood上的如何培養(yǎng)EPC的文獻,希望對大家有用。文件太大(475kb),不能上傳,所以給出全文摘要。

EPC生長特征.doc (35.0k)

 

我們買的VEGF是 sigma公司的,2微克包裝的,500塊錢,bFGF沒買,我們用的是M199培養(yǎng)基+VEGF+PEX+20%FBS養(yǎng)的兔的EPC,效果還行。
以前用的是EGM培養(yǎng)基,后來有一陣子EGM國內缺貨,就改用了上述配方。
兩種相比較,EGM培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的狀態(tài)穩(wěn)定一些,而且細胞生長較均勻,現在用的這這種培養(yǎng)基養(yǎng)的EPC原代的時候全部成簇狀生長,也就是說一個培養(yǎng)瓶里長幾大團細胞,沒有細胞簇的地方幾乎都是空的。長了6天以后有細胞的地方非常密,我們就消化,把細胞吹下來后還是放在原瓶里長,細胞就長得比較均勻了,生長速度也還可以。
以前用EGM時我們用的是5%血清濃度,現在用M199是20%血清濃度,但是感覺還是沒有EGM時長得快。

 

請教大家:
加VEGF誘導骨髓細胞應在什么時候加?大概傳幾代啊?


寒冰 wrote:
請都各位,我準備培養(yǎng)大鼠的EPC,不知大家所用的VEGF和b-FGF是哪家公司的,有小包裝嗎?

下面是一篇blood上的如何培養(yǎng)EPC的文獻,希望對大家有用。文件太大(475kb),不能上傳,所以給出全文摘要。


幫你把全文上傳下
分成2部分,都下載后,放在同一個文件下,然后解壓part1就可以了。

2577.part1.rar (244.14k)

22222222222222222222222222222

2577.part2.rar (211.6k)

 

請問cici_wl 師兄:

你是培養(yǎng)大鼠EPC嗎,EGM是哪家公司的,培養(yǎng)板包被了嗎,是自己包的嗎?

謝謝。

 

playingstone前輩,請教您一下:
骨髓源的內皮祖細胞是本身就存在于骨髓的,而不是由MSCs分化而來的嗎?如果是,它的前身是什么?
MSCs能不能分化為內皮祖細胞,還是只能分化為成熟內皮細胞?
我見到的文獻好像不管是骨髓、外周血、臍血的內皮祖細胞,都是直接就用內皮細胞誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)。就您所知,有沒有先擴增MSCs,再將其誘導為EPCs的?

 

請問各位:你們消化EPC時候,覺得好消化嗎?含EDTA的胰酶大概要作用多久啊?
我消化了15分鐘(37度),吹打了幾次才勉強下來!!

 

請問:

用DMEM低糖 和 高糖 的培養(yǎng)基對細胞的影響是什么呢?為什么MSC要用低糖的呢?

懇請指教。謝謝!

 

harry158:

你好,我也打不開下面這篇綜述,能否發(fā)一份到郵箱(newbyte163@163.com)

綜述 <Unresolved questions, changing definitions, and novel paradigms for defining endothelial progenitor cells >
(blood ,106,1525-1531).

 

我已經分離了數次臍血里的EPC,大家說的這些我好象似曾見過,可鑒定時總是CD133(-)和CD34(-),但每次貼負在FIBRONECTIN上細胞也不少,我真不知道如果不是EPC會是什么,作了快3個月了,一直這樣,都快崩潰了,大家?guī)臀页龀鲋饕獍?多謝.

 

meini:
這片文獻上有很漂亮的EPC集落 "Granulocyte Colony-Stimulating Factor Mobilizes Functional Endothelial Progenitor Cells in Patients With Coronary Artery Disease"(Arterioscler Thromb Vasc Biol. 2005;25:296-301.)
是pdf 文件,不知道怎么上傳,如果有需要請告訴我郵箱.
我的郵箱是newbyte163@163.com,非常感謝.

 

求合購:

我現已問好小鼠CD 133 和FLK-1 上流式檢測抗體,最小包裝分別為25微克和50微克。(為Biosource公司產品)(都可以上100管以上)

由于本人只能用一半的量。價錢比較昂貴。想找位戰(zhàn)友一起分享。我在武漢。有意者請與我聯(lián)系。qq 358228927。 手機:13476210795

急!!急!!急!!

 

不好意思,才回貼。前一段時間出去開會。
現在EPC培養(yǎng)有些進展,也拍了圖片,但我的圖片都比較大,不能上傳,如你感興趣我可以發(fā)給你。從形態(tài)、FCM還是IHC均是EPC。

請問羥乙基淀粉沉淀紅細胞怎么做?

 

不好意思,才回貼。前一段時間出去開會。
現在EPC培養(yǎng)有些進展,也拍了圖片,但我的圖片都比較大,不能上傳,如你感興趣我可以發(fā)給你。從形態(tài)、FCM還是IHC均是EPC。

請問羥乙基淀粉沉淀紅細胞怎么做?

 

樓上的PDF文件均打不開,各位都能否MAIL給我。再次感激不禁。我有的東西,不會讓各位失望的。多多交流。xiexie
my mail: dryudecai@hotmail.com

 

強烈建議我們開個網絡會議!
方式: Hotmail MSN
時間待定:大家商量
我想一起聊天,可能效果更好

 

為表誠意,我先貼有關EPC的reriew。
多指教


 

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