近日，第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所第四研究室/全軍交通醫(yī)學研究所/創(chuàng)傷燒傷與復合傷國家重點實驗室研究人員發(fā)表論文，旨在建立簡單、可靠的大鼠表皮基底層干細胞體外分離培養(yǎng)方法。研究指出，兩步消化聯(lián)合Ⅳ型膠原差速貼壁法獲取基底層干細胞簡易可行，培養(yǎng)的細胞活力好、表型可靠。該文發(fā)表在2013年第21期《重慶醫(yī)學》雜志上。
取新生大鼠背部皮膚，采用胰酶兩步消化法獲得單細胞懸液，Ⅳ型膠原差速貼壁法富集干細胞，將慢黏附細胞作為對照組細胞，均以角質形成細胞無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)。以β1-整合素和角蛋白19（K19）雙重熒光染色鑒定細胞表型，克隆形成實驗檢測細胞體外增殖能力。
分離培養(yǎng)的細胞為多角形、呈鋪路石樣排列，倍增時間約為24h，細胞形態(tài)和生長規(guī)律符合基底層干細胞的特征。免疫熒光鑒定顯示細胞共表達β1-整合素和K19，基底層干細胞克隆形成能力顯著強于對照細胞。
無血清培養(yǎng)基UltraCULTURE Serum-free Medium
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