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有兩種方法可以使細胞適應無血清培養基(SFM): 1.直接適應法式—將細胞直接從添加血清的培養基轉換到無血清培養基中。 2.連續適應或循序隔絕法—分幾步將細胞從添加血清的培養基轉換到無血清培養基中。與直接適應法相比較，連續適應法對于細胞更溫和些。 為了使細胞適應無血清培養基，關鍵是細胞培養應滿足以下條件： 1.處于對數生長中期 2.存活率大于90% 3.在適應期間，以較高的初始細胞接種量進行接種下面列出了常規適應步驟。初始細胞接種量、細胞產量和培養周期是連續優化的良好開端。 直接適應 有些類型的細胞可以直接從含有血清培養基適應無血清培養基。 對于直接適應，細胞接種量應在2.5 x 105 -3.5 x 105細胞/ml范圍內，當細胞密度達到1 x 106-3 x 106細胞/ml時，傳代培養細胞。培養4至7天后，當細胞密度達到2 x 106 -4 x 106細胞/ml時，細胞已完全適應了無血清培養基。當細胞密度達到1x 106 -3 x 106細胞/ml且存活率為90%時，應當每隔3到5天再次將適應了無血清培養基的貯存細胞在無血清培養基中進行傳代培養。
lonza 無血清 培養基網址鏈接http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2013/0331/5024.html |
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