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 Turbo Chemically Competent Cell 使用說明書

產(chǎn)品說明：

Turbo 菌株是生長最快的大腸桿菌菌株。平板上 6.5 小時(shí)可見克隆，營養(yǎng)液中搖菌 4-6 小時(shí)可提取質(zhì)粒，缺失核酸內(nèi)切酶 (endA)，提高了質(zhì)粒 DNA 的產(chǎn)量和質(zhì)量；Turbo 菌株可嚴(yán)格控制 lacl q的表達(dá)，可以克隆毒性基因；fhuA2 突變賦予 Turbo 菌株對噬菌體 T1 的抗性；lacZΔM15 的存在使 Turbo 可用于藍(lán)、白斑篩選。Turbo 感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作，pUC19 質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>5×10⁸ cfu/μg。

產(chǎn)品組成：

* 基因型：F' proA⁺B⁺ lacI q ΔlacZM15 / fhuA2 Δ(lac-proAB) glnV galK16 galE15 R(zgb-210::Tn10) Tet ^S endA1 thi-1 Δ(hsdS-mcrB)5

儲存條件：

-80℃±10℃保存6個(gè)月。請勿將本品置于-20℃或液氮中保存。

使用方法：

1.       將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃冰箱中取出，置于冰水浴中融化。

2.       將目的DNA（質(zhì)粒或連接產(chǎn)物）加入到100μL感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。

3.       42℃水浴熱激45秒后，立刻置于冰上，靜置2～3分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。

4.       向離心管中加入200μL無抗LB、TB或SOC培養(yǎng)基，混勻后于220rpm，37℃搖床振蕩復(fù)蘇60分鐘，使轉(zhuǎn)化物表達(dá)抗性基因。

5.       根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求吸取適量菌液，涂布至相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上，室溫正置10分鐘，待菌液被平板充分吸收后，37℃倒置培養(yǎng)6.5小時(shí)以上。

注意事項(xiàng)：

1.       感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中緩慢融化。插入冰中8分鐘內(nèi)加入目的DNA，不可在冰上放置時(shí)間過長，長時(shí)間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。

2.       待轉(zhuǎn)化DNA加入體積不要超過感受態(tài)細(xì)胞體積的1/10。

3.       待轉(zhuǎn)化DNA加入感受態(tài)細(xì)胞后，請勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。

4.       為確保最高效率轉(zhuǎn)化，整個(gè)操作過程應(yīng)盡量輕柔，并保持冰上操作。

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